微生物檢驗包括病原體分離、鑒定,產品衛生指標檢測,醫療用品和器械無菌試驗,消毒產品殺滅效果試驗,微生物的生化特性研究,分子生物學研究和疫苗研究等。對于工作環境均有一定的要求。目前尚未見到更多的資料報道微生物檢驗潔凈實驗室的布局、技術要求。我們根據病原體分離、衛生指標檢測、無菌試驗、殺滅效果試驗等工作性質和工作環境要求,設計、研究和建造微生物潔凈實驗,現將結果報告如下。

材料與方法

1?設計要求

1.1?微生物檢驗潔凈度?

    潔凈室工作臺面為100級;室內環境為1000級;緩沖間為10000級;更衣和換鞋間為100000級。

1.2?新風進入量和換氣次數?

    新風進入量≥20%;潔凈室換氣次數≥50次;緩沖間≥25次;更衣、換鞋間≥15次。病原體分離和消毒產品殺滅試驗潔凈實驗室回風過濾后排放室外。

1.3?潔凈實驗室布局

1.3.1?衛生防疫系統的微生物檢測應設無菌試驗潔凈室一間;衛生指標檢測潔凈室一間;病原體分離、鑒定、消毒產品殺滅效果試驗潔凈室二間,見圖1。

1.3.2?潔凈室1、2靜壓差為正壓,潔凈室3、4靜壓差為相對負壓。

1.3.3?根據無菌產品檢測時對外包裝必須經過清潔處理的要求:設計1m2的傳遞窗,擇品在傳遞窗內由上端送入的10000級凈空氣吹去塵埃處理。

1.3.4?保證潔凈室內的氣溫達到18～25℃的要求;冷和熱的空氣必須經過凈化后送入,確保氣流上送下回的要求。

1.3.5?人流和物流應分開,工作人員換鞋后?更衣?風淋?緩沖室?潔凈實驗室內。物品從傳遞窗上部送入,工作完畢后的廢物從傳遞窗下部取出。

1.3.6?安全裝置包括建造安全通道及各潔凈室均有警報裝置。

2?檢測方法

2.1?儀器?

①BCJ—1型塵埃粒子計數器(中科院上海大恒光電公司華達儀器設備廠)。

②YJB21500補償微壓計(上海氣象儀器廠)。

③EMB數字風速儀(上海天宇科技應用研究所)。

④HS6280D聲級儀(國營四三八○二廠嘉興分廠)。

2.2?方法?

    按“潔凈室施工及驗收規范”和GB50243通風與空調工程施工及驗收規范”要求:靜壓差、潔凈度、沉降菌、室內溫度、相對濕度、噪音、各送風口風速、新風量、總送風量和換氣次數檢測。

1?潔凈度?

    潔凈室(1～4號)內≥0.5μm塵埃檢測結果表明:工作臺面(層流罩下面)均<3.5個/L,達到100級潔凈度,室內環境為<35個/L,達到1000級潔凈度,見表1。

    緩沖室Ⅰ≥0.5μm塵埃為202個/L,緩沖室Ⅱ為154個/L,均小于350個/L的10000級潔凈標準。

2?各送風口風速和送風量?

    中效總風機每小時送風為7895m3,其中新風口送入新風為每小時2700m3,新風比率為34.2%,超過20%的要求。整個潔凈室內換氣次數達到52.97次,大于50次的要求。其中潔凈室1～4送風口風速均大于0.25m/s,換氣次數大于100次,見表2。緩沖間Ⅰ換氣數為19.2次,緩沖間Ⅱ為34.4次,更衣和換鞋間為11.5次。

3?靜壓差?

    潔凈室Ⅰ對緩沖室Ⅱ為18.03pa,潔凈室Ⅱ對安全通道為25.68pa,潔凈室Ⅲ和Ⅳ對緩沖室Ⅰ為-2.35pa,換鞋和更衣對潔凈室處為5pa。

4?室內沉降菌?

    潔凈室1～4號的工作臺面按14只/m2檢測沉降菌,平均為0.15～c0.25cfu/皿30min之間。室內環境平均為1～2cfu/皿30min之間;緩沖間平均為7cfu/皿30min,更衣間平均為21cfu/皿30min。

5?噪音、溫度?

    潔凈室內噪音均在55dB以下。當調節溫度開機后,潔凈室Ⅰ和Ⅱ均在30min內達到調節溫度,潔凈室Ⅲ和Ⅳ及緩沖間、更衣室均在45min內達到調節溫度。

    傳統的微生物檢測實驗室采取建造緩沖間,使實驗室與外界隔離,在進行實驗操作時不受外界氣流的影響,使實驗檢測不污染。但由于室內空氣不流通,室內空氣混濁,夏季工作室內氣溫高,冬季室內氣溫低,不但對微生物工作者的身體影響較大,而且還影響實驗檢測。近年來,室內空調的使用,造成微生物實驗室內氣流混亂,直接影響檢測結果。因此,根據衛生防疫系統的業務工作要求,設計能適應無菌檢測,殺滅效果試驗,衛生指標檢測,病原體分離鑒定,流行病分子生物研究的微生物檢測潔凈實驗室是必然趨勢,它不同于其他工業潔凈室,開展不同內容的微生物檢測工作,均有特殊的要求。

    我們設計的微生物潔凈實驗室,具備以下幾方面的要求。

1?潔凈室采用上送下回的氣流方式,層流罩送入100級潔凈風,環境送入1000級潔凈風,要求在層流罩隔離屏去掉情況下,工作臺面的100級潔凈度不受影響。室內頂部四周不形成氣流死角。

2?進行病原體分離、鑒定、殺滅效果試驗,血清學試驗,分子生物學研究等工作的實驗室,由于使用已知和未知的微生物(細菌菌株、真菌菌株和病毒毒種等),當微粒污染工作臺面等地方或在操作過程中,經氣流沖擊將成為≤0.5μm的微粒,在空氣中形成氣溶膠狀態,容易造成實驗室感染,在設計過程中要求該實驗室的氣壓與一緩成相對負壓,回風經過過濾后,由風機排放室外,不再重復使用,成為全新風的實驗室。

3?微生物檢測潔凈室一般面積都不大,在未采用中央空調調節氣溫的情況下,只能用柜式空調控制室內氣溫,但不能將柜機直接安裝在潔凈實驗室內,因柜機吹出的風會改變潔凈室的氣流流向,破壞潔凈度。

    本次研究、設計、建造的微生物檢測潔凈室只有60m2,其中2m2為機房,柜機安裝在機房內,新風和回風混合后,由柜機將混合空氣制冷或制熱后,通過風管送入總風機,再由總風機輸送到各潔凈室,室內空氣在45～30min均達到控制溫度的要求,同時不破壞氣流的流向。

4?微生物檢測潔凈實驗室總換氣次數達50次以上,4只潔凈室按每只4名工作人員計算,每人每小時新鮮空氣達到大于40m3的要求。但有緩沖間Ⅰ和更衣換鞋間的換氣次數未達到25次和15次。主要原因是二間潔凈室的回風利用緩沖間Ⅰ和更衣換鞋室送回機房。

5?為了使送入潔凈室內的物品減輕對潔凈室的污染,物品必須通過傳遞窗送入,同時,進行無菌試驗的物品在進行檢測時,必須進行外包裝清潔、除菌。設1m2的傳遞窗,并有1000級潔凈空氣通入,均能達到上述的要求。

    目前,各單位為了適應工作范圍的要求,改造微生物檢測的潔凈環境,提高微生物檢測水平,因此,在設計微生物檢測潔凈實驗的過程中,應考慮到檢測工作的特殊要求。